在做檢測時,有不少關于“測定藥物的最低抑菌濃度常采用什么方法”的問題,這里百檢網給大家簡單解答一下這個問題。

測定藥物的最低抑菌濃度的常用方法包括：肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法和微量稀釋法等。

一、肉湯稀釋法

肉湯稀釋法是一種通過逐步在營養肉湯中加入微生物樣本并逐級稀釋，以測定微生物在特定條件下的生長抑制濃度的方法。其原理基于微生物在適宜培養基中的生長繁殖能力，通過稀釋降低微生物濃度，直至找到不引起可見生長的最低藥物濃度。優點是操作簡便，適合大規模初步篩選；缺點在于無法精確計數，且結果易受培養基成分影響，對于低濃度抑制效果不敏感。該方法的操作步驟如下：

1、制備藥物溶液：將藥物溶解在適當的溶劑中，通常為生理鹽水或蒸餾水，以制備一定濃度的藥物溶液。

2、制備菌液：將待測細菌培養至對數生長期，然后調整菌液濃度至一定標準，如0.5 McFarland標準。

3、藥物稀釋：將藥物溶液進行連續稀釋，形成一系列不同濃度的稀釋液。

4、混合菌液和藥物：將調整好的菌液與不同濃度的藥物稀釋液混合，通常在96孔板中進行。

5、培養和觀察：將混合后的菌液在適宜的溫度下培養一定時間，然后觀察菌液的生長情況，以確定最低抑菌濃度。

二、瓊脂稀釋法

瓊脂稀釋法利用含有不同濃度抗菌藥物的瓊脂平板，將微生物樣本均勻涂布其上，通過觀察微生物生長形成的菌落形態及數量，評估藥物的抑菌效果。該方法能直觀展示藥物對微生物的抑制作用，且可同時進行多濃度測試。優點是結果直觀、可重復性好；缺點是操作相對繁瑣，耗時較長，且對于低生長速率的微生物檢測可能不夠靈敏。該方法的操作步驟如下：

1、制備藥物溶液：與肉湯稀釋法相同，首先制備一定濃度的藥物溶液。

2、制備瓊脂培養基：將瓊脂與營養培養基混合，加熱至瓊脂完全溶解，然后冷卻至適宜溫度。

3、藥物稀釋：將藥物溶液加入到瓊脂培養基中，形成一系列不同濃度的瓊脂培養基。

4、倒板：將不同濃度的瓊脂培養基倒入平板中，待其凝固。

5、接種和培養：在凝固后的瓊脂平板上接種待測菌液，然后在適宜的溫度下培養一定時間。

6、觀察和測定：觀察平板上的生長情況，以確定最低抑菌濃度。

三、微量稀釋法

微量稀釋法是在微量孔板（如96孔板）中，通過精密儀器自動或手工分配固定體積的抗菌藥物和微生物懸液，實現高效、精確的濃度梯度稀釋。其優勢在于能準確測定最低抑菌濃度（MIC），所需樣品和試劑量少，自動化程度高，適合大規模藥物敏感性測試。該方法對設備和操作精度要求較高，成本相對較大，且對于某些特殊微生物或復雜樣本的處理可能存在局限性。該方法的操作步驟如下：

1、制備藥物溶液：與肉湯稀釋法相同，首先制備一定濃度的藥物溶液。

2、微量稀釋：將藥物溶液進行微量稀釋，形成一系列不同濃度的稀釋液。

3、混合菌液和藥物：將微量稀釋后的藥物稀釋液與待測菌液混合，通常在96孔板中進行。

4、培養和觀察：將混合后的菌液在適宜的溫度下培養一定時間，然后觀察菌液的生長情況，以確定最低抑菌濃度。